Obtención de la semilla
La semilla de los hongos se refiere para el caso de los hongos comestibles Pleurotus ostreatus a la fase micelial del hongo utilizada para inocular los sustratos, para esta investigación la semilla se obtendrá en un laboratorio de la ciudad en la ciudad de Bogotá, quienes tienen certificación para su producción y comercialización.
Inoculación del sustrato
Etapa en la cual la semilla se agrega a los sustratos. La tasa de inoculación será al cinco 5% del peso húmedo del tratamiento Y la inoculación se realizará agregando 50 g de semilla primaria (granos de trigo con micelio) por cada bolsa de 1 Kg de sustrato evaluado. Este proceso también se llevará a cabo en un recinto sin corrientes de aire, donde se aplicará alcohol al 70 % y con mechero encendido para evitar contaminación por eventuales esporas en el aire.
Incubación
La incubación se realizará en un recinto cerrado, sin iluminación en condiciones medidas de temperatura ambiente y humedad relativa, para mantener la temperatura lo más estable posible se colocarán las bolsas envueltas en capas de cartón. La temperatura y la humedad relativa serán medias por un termo higrómetro cada 2 horas durante el día y una vez al entrar la noche, la temperatura deberá garantizarse en un rango de 25°C a 30°C, y la humedad relativa del lugar donde se realizará el cultivo según datos del IDEAM ronda el 70%, humedad apropiada para esta fase del cultivo, en caso de ser necesario corregir la humedad se humedecen las paredes del recinto con rociado de agua.
Los tratamientos inoculados serán colocados en estantes de madera recubiertos por cartón a una distancia de 10 cm entre bolsa y bolsa y distribuidos al azar en los diferentes estantes, de tal manera que se encontrarán bajo las mismas condiciones ambientales de cultivo y completar la colonización del micelio de orellana (P. ostreatus).
En esta etapa se mantendrán prácticas de higiene al ingresar a la sala de incubación: desinfección de la planta de los zapatos con cal dispuesta en un recipiente, lavado de manos y desinfección con alcohol al 70% y uso de bata, tapabocas, guantes y cofia.
La fase de incubación será determinada como alcanzada cuando las bolsas se vean blancas en todos los tratamientos (apariencia de algodón) y se anotarán los días hasta este momento.
Inducción y fructificación
Esta etapa consiste en establecer condiciones ambientales de temperatura, humedad, luminosidad y ventilación para inducir la formación de los primordios y el desarrollo de los cuerpos fructíferos.
La temperatura y la humedad relativa será medidas con un termo higrómetro comercial, como se trata de un cultivo artesanal las condiciones ambientales se establecerán por medio de medios manuales sencillos: para la temperatura, ventilación y luminosidad, se abrirán las puertas y ventanas del recinto y para mantener la humedad relativa se realizarán riegos diarios en pisos y paredes, rangos de 15°C a 20 ºC para la temperatura, humedad relativa entre 80 y 90% e iluminación de 700 a 1000 luz/hora durante 12 horas al día, también se realizarán rocíos diarios con un atomizador de rocío fino sobre las bolsas.
Los tratamientos serán colocados en estantes de madera a una distancia de 20 cm entre bolsas, distribuidos al azar en cada uno de los estantes, de tal manera que se encontrarán bajo las mismas condiciones ambientales de cultivo. Luego se realizarán cortes longitudinales parciales de tres centímetros de largo separados de 10 centímetros unos de otros con un bisturí desinfectado con alcohol al 70 %.
Se anotará los días en que aparezcan los primeros primordios, una vez que aparezcan los primordios se suspenderá el riego de rocío sobre los sustratos hasta el momento de su cosecha, los riegos a las paredes y piso del ambiente continuarán para mantener las condiciones de humedad.
En esta etapa, también se mantendrán prácticas de higiene al ingresar a la sala de fructificación: desinfección de la planta de los zapatos con cal, lavado de manos y desinfección con alcohol al 70% y uso de bata, cofia y tapabocas.
La cosecha se realizará con los dedos de la mano girando levemente hasta retirarlos de la bolsa. Este procedimiento se realizará una vez por semana, hasta agotar los sustratos. Los cuerpos fructíferos cosechados serán pesados en una balanza, valor que será registrado como peso fresco del hongo cosechado en gramos.